تست سریع بارداری با خون 
NG-test تست سریع بارداری و یک وسیله برای تشخیص کیفی گنادوتروپین جفتی انسان (hCG) در خون تنها در فاصله 7 تا 10 روز بعد از بارداری
کاربرد
تست بارداری اچ سی جی، یک روش برای تشخیص اولیه وجود هورمون گنادوتروپین جفتی انسان در خون است. از این تست برای تشخیص ابتدایی بارداری استفاده می شود. میزان حساسیت تشخیص این محصول 10mIU/mL است. 

هورمون hCG چیست؟
هورمون گنادوتروپین جفتی انسان (hCG) یک گلیکو پروتئین است که در طول بارداری توسط جفت ترشح می شود. در بارداری طبیعی، اچ سی جی 7 تا 10 روز پس از بارداری در خون تشخیص داده می شود وسطح هورمون اچ سی جی به سرعت افزایش می یابد و به سرعت به بیش از100mIU/mL می رسد. 

ماهیت تست بارداری hCG
تست بارداری اچ سی جی، یک روش ایمونواسی رنگی است که برای تشخیص کیفی وجود هورمون گنادوتروپین جفتی انسان در خون به کار می رود. از این تست برای تشخیص ابتدایی بارداری استفاده می شود. جهت تشخیص افزایش اچ سی جی در خون، در این تست از پادتن مونوکلونال هورمون اچ سی جی استفاده می گردد. این تست با توزیع مقداری نمونه خون بر نمونه کاست انجام می گیرد. به منظور تسریع عمل مویینگی از نوار ، محلول بافر به خون در  R اضافه می گردد. سپس نمونه از غشا به سمت پنجره نتایج حرکت میکند ، محدوده کنترل باید یک خط قرمز  ظاهر شود. ظهور یک یا دو خط قرمز در این محدوده نشانگر درستی انجام آزمایش است. ظهور دو خط قرمز (یک خط در نقطه T(تست) و دیگری در نقطه C (کنترل)) نشان دهنده وجود هورمون اچ سی جی در نمونه است. اگر میزان هورمون اچ سی جی قابل ملاحظه نبود (X<10 mIU/ml)، تنها یک خط قرمز در پنجره نتیجه ظاهر می شود.

محتویات داخل هر بسته از تست بارداری NG-test
  1 عددکاست، مهر و موم شده توسط خشک کن در یک کیسه فویلی 
1 عدد میکروپیپت کالیبره، قادر به انتقال دقیق 20μl
  1 عدد سوزن استریل
 1 عدد پد آمادگی الکل 
1 عدد محلول بافر در قطره چکان پلاستیکی 
 2 عد برچسب شناسایی صاحب تست
 

موارد احتیاط:
•    تنها جهت استفاده برای تشخیص آزمایشگاهی 
•    پس از تاریخ انقضا، از محصول استفاده نکنید. 
•    وسیله آزمایش باید تا زمان استفاده، مهر و موم شده در کیسه قرار بگیرد. 
•    به تمام نمونه ها مخصوصا نمونه های عفونی رسیدگی کنید. 
•    پس از آزمایش، وسیله آزمایش را در سطل زباله مناسب نگذارید. 
•    نباید از وسیله آزمایش مجدداً استفاده شود. 

نگهداری 
 محصول را در دمای 4-30 درجه سانتی گراد در کیسه مهر و موم شده نگاه دارید. تا زمان تاریخ انقضای مندرج بر روی کیت یا کیسه فویلی، وسایل آزمایش سالم باقی می مانند. 
توجه: از فریز کردن این محصول خودداری کنید. 

طریقه استفاده
از خون تازه سر انگشتان برای نمونه گیری استفاده می گردد. با این وجود می توان از خون تازه ای که منعقد نشده است، نیز برای نمونه گیری استفاده کرد. می توان از ادتا ، هپارین یا اکسالات به عنوان داروی ضد انعقاد خون استفاده نمود. نمونه باید در شیشه یا ظرف پلاستیکی تمیزی نگاه داشته شود. درصورتی که امکان آزمایش سریع وجود نداشته باشد، نمونه باید تا 72 ساعت قبل از آزمایش در دمای 2-8 درجه سانتی گراد نگاه داشته شود. نباید از نمونه های آلوده یا منعقدشده برای آزمایش استفاده کرد. 

طریقه مصرف
1. دستکش یک بار مصرف بپوشید. 
2. قبل از آزمایش، محتویات کیت را به دمای اتاق برسانید. 
3. در صورتی که کیسه در دمای 4 تا 8 درجه سانتی گراد نگهداری می شود، وسیله را حداقل 10 دقیقه در دمای اتاق بگذارید. 
4. کیسه را باز کنید و وسیله را بردارید. به محض باز شدن کیسه، باید از وسیله استفاده کرد. 
5. جهت نمونه گیری سریع از خون، بیمار باید حداقل سه دقیقه دست خود را پایین بگیرد. انگشت سوم یا چهارم دست چپ را با پنبه الکلی تمیز کنید و قبل از انجام آزمایش آن را خشک کنید.
6. سوزن استریل را باز کنید و اطراف نوع انگشت بیمار را سوراخ کنید تا یک قطره خون (20μl) بگیرید. انگشت را به آرامی به سمت نوک انگشت ماساژ دهید تا قطره خونی شکل بگیرد. 
7. میکروپیپت مویرگی را افقی نگاه دارید و نمونه خون را با نوک میکروپیپت جمع آوری کنید. 
توجه: پر شدن توسط عمل مویرگی صورت می گیرد. تا زمان اتمام نمونه گیری، تیوپ را فشار ندهید. 
8. جهت خارج کردن نمونه، نوک میکروپیپت را روی نقطه ای از پد نمونه به عنوان "S" قرار دهید و لامپ میکروپیپت را فشار ندهید.
توجه: نمونه باید سریع به پد نمونه گیری انتقال داده گردد تا نمونه انعقاد نیابد. 
9.  2 قطره محلول بافر (2*4μl) را در محفظه معرف به نام "R" بریزید. 
10. نتیجه را ظرف مدت 10 دقیقه بخوانید و به شرح ذیل تفسیر کنید. 
توجه: نتیجه را حداکثر ظرف مدت ده دقیقه بخوانید (ممکن است نتیجه تغییر کند). 

تفسیر نتیجه
نتیجه منفی
 وجود تنها یک خط قرمز در محدوده کنترل (C)، نشانگر این است که نمونه دارای اچ سی جی قابل مشاهده ای نیست و نتیجه آزمایش منفی است. 

نتیجه مثبت
وجود دو خط قرمز در محدوده کنترل (C) و محدوده تست (T)، نشانگر این است که غلظت هورمون hCG نمونه برابر یا بیش از  mIU/mL10 و نتیجه آزمایش مثبت است.

نتیجه نامعتبر
اگر نوار کنترل مشاهده نشود، نتیجه تست نامعتبر است. مقدار ناکافی نمونه یا تکنیک های اشتباه، مهمترین دلایل عدم مشاهده خط کنترل هستند. ممکن است کیت آزمایش آلوده شود. 

توجه: شدت رنگ قرمز در نوار تست (T) بر اساس میزان هورمون اچ سی جی نمونه متفاوت است. با این وجود، میزان کمی و سطح افزایش هورمون اچ سی جی توسط این آزمایش کیفی مشخص نمی شود. 

محدودیات
1. در صورتی که میزان هورمون hCG کمتر از سطح مطلوب باشد (10 mIU/mL)، ممکن است نتایج منفی اشتباه نیز مشاهده گردند. اگر هنوز احتمال بارداری وجود دارد، آزمایش را 48 ساعت بعد تکرار کنید. 
2. در آزمایشاتی که پس از مدتی کوتاه از لقاح صورت می پذیرند، hCG بسیار کمی وجود دارد. به هرحال، از آنجاییکه تعداد زیادی از بارداری ها در سه ماه اول به دلایل طبیعی تمام  می شوند، جواب تستی که مثبت اما ضعیف است باید با آزمایش گیری مجدد ظرف 48 ساعت بعد تائید شود. 
3. شرایط دیگری به غیر از بارداری نیز موجب افزایش هورمون hCG می شوند، همچون بیماری تروفوبلاستیک، تومور بیضه، سرطان سینه و سرطان ریه. در نتیجه، وجود hCG در خون به تنهایی برای تشخیص بارداری زمانی بکار میرود که چنین شرایطی از پیش حذف شده باشند. 
4. همانند سایر آزمایشاتی که از آنتی بادی موشی استفاده می کنند، احتمال تداخل ضدآنتی بادی موشی (HAMA) در نمونه وجود دارد. ممکن است نمونه های بیمارانی که جهت تشخیص درمان، آمادگی لازم برای آنتی بادی مونوکلونال را کسب کرده اند، حاوی HAMA باشد. چنین نمونه هایی می توانند باعث حصول نتایج مثبت و یا منفی اشتباه گردند.
5. این تست تشخیص اولیه بارداری است. 
تشخیص قطعی بارداری باید توسط پزشک و پس از بررسی کامل تمام یافته های آزمایشگاهی و کلینیکی صورت پذیرد. 

سطوح مورد انتظار هورمون 
در زنان غیرباردار سالم و مردان سالم نتیجه منفی است. مقدار هورمون اچ سی جی بر اساس سن حاملگی و در افراد مختلف، متفاوت است. 
میزان و سطح حساسیت  تست اچ س جی  10mIU/mL است و یک روز پیش از تاریخ مورد انتظار می تواند بارداری را تشخیص دهد. 

ویژگی های عملکرد
اضافه کردن LH (300 mUl/mL)،FSH (1000mUI/mL)، و TSH (1000mUl/mL) به نمونه های 
(0 mlU/mL)=  hCG و یا hCGبیشتر از(10mlU/mL) هیچ تاثیر جانبی نشان نداد.
عناصر مداخله گر ذیل به نمونه های مثبت و منفی hCG اضافه شدند. هیچ یک از این عناصر آزمایش شده در این تست مداخله ای نداشتند. 
سطح تغلیظ    عناصر مداخله گر
174lU/mL    عامل روماتوئید
715 ng/mL    ضدآنتی بادی موشی
Titer > 1280    آنتی بادی ضد هسته (نوع سانترومر خالدار هستکی و همگن)
200 µg/mL    کافئین

حساسیت

این تست ها بر روی نمونه های واقعی انجام و با مقیاس آزمایشگاهی سنجیده شده اند.
3 فرد با نمونه خون 1: HCG<2 mIU/mL
3 فرد با نمونه خون 2: [HCG] = 8 mIU/mL  
3 فرد با نمونه خون 3: [HCG] = 10 mIU/mL
3 فرد با نمونه خون 4: [HCG] = 11 mIU/mL
  
<2 mIU/ml   8 mIU/ml  10 mIU/ml   11 mIU/ml
Lot 1                 neg            neg            pos               pos  
Lot 2                  neg           neg            pos                pos 
Lot 3                neg           neg             pos                  pos                                             

بر روی 3 نمونه خونی با غلظت [HCG] <2 mIU/mL بیست بار آزمایش تکرار شد و در کل شصت تکرار روی این غلظت صورت گرفت.
بر روی هر یک از 3 نمونه خونی با غلظت های هورمونیHCG 10  11   8
12  تکرار صورت پذیرفت. 
نتیجه این آزمایشات حاکی از حساسیت تست ، 10mIU/ml و دارای احتمال 99.9% است. 

استانداردسازی:
استاندارد این تست بر اساس استاندارد بین المللی پنجم W.H.O رعایت شده است.

پدیده هوک
هیچ تاثیر پروزونی تا 500,000mIU/mL مشاهده نشده است. 
برای نمونه هایی که سطوح هورمون اچ سی جی آنها بیش از 500,000mIU/mL است،نوار تست با رنگ کم رنگ تری از حد انتظار به نظر می رسد. 

دقت 
بررسی شامل 168 نمونه خونی، 72 نتیجه مثبت با غلظت 10mIU/ml و بیشتر و 96 نمونه اچ سی جی منفی با نتایج زیر است. 

             مثبت    منفی
     مثبت    72    0
     منفی    0    96

این نتایج نشان دهنده تطابق 100% تست اچ سی جی با روش معیار است. 

مراجع 

1Batzer FR. Fertil Steril. Hormonal evaluation of early pregnancy. 1980 Jul; 34(1): 1 13.
2.    Catt KJ, Dufau ML, Vaitukaitis JL. Appearance of hCG in pregnancy plasma following the initiation of implantation of the blastocyst. J Clin Endocrinol Metab. 1975 Mar; 40(3): 537-40. 
3.    Braunstein GD, Rasor J, Danzer H, Adler D, Wade ME. Serum human chorionic gonadotropin levels throughout normal pregnancy. Am J Obstet Gynecol. 1976 Nov 15; 126(6): 678-81.
4.    Lenton EA, Neal LM, Sulaiman R. Plasma concentrations of human chorionic gonadotropin from the time of implantation until the second week of pregnancy. Fertil Steril. 1982 Jun; 37(6): 773-8. 
5.    Engvall E. Enzyme immunoassay ELISA and EMIT. Methods Enzymol. 1980; 70(A): 419-39.
6.    Uotila M, Ruoslahti E, Engvall E. Two-site sandwich enzyme immunoassay with monoclonal antibodies to human alpha-fetoprotein. J Immunol Methods. 1981; 42(1): 11-5.
7.    Steier JA, Bergsjø P, Myking OL.  Human chorionic gonadotropin in maternal plasma after induced abortion, spontaneous abortion, and removed ectopic pregnancy. Obstet Gynecol. 1984 Sep; 64(3): 391-4. 
8.    Dawood MY, Saxena BB, Landesman R. Human chorionic gonadotropin and its subunits in hydatidiform mole and choriocarcinoma. Obstet Gynecol. 1977 Aug; 50(2): 172-81.
9.    Braunstein GD, Vaitukaitis JL, Carbone PP, Ross GT. Ectopic production of human chorionic gonadotrophin by neoplasms. Ann Intern Med. 1973 Jan; 78(1): 39-45.